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導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些
2020-08-11 ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見(jiàn)的問(wèn)題，那么，ELISA試劑盒變質(zhì)是因?yàn)槭裁茨兀渴鞘裁从绊懥薊LISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢？一、方法學(xué)的影響ELISA測(cè)定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不gong平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。二、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)...
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前常規(guī)樣本的收集及處理方法
2020-05-27 ELISA試劑盒檢測(cè)的目的是為實(shí)驗(yàn)提供可靠定量分析實(shí)驗(yàn)的依據(jù)。它的每一步都需要大家謹(jǐn)慎小心，在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本及時(shí)儲(chǔ)存在4℃冷藏箱中備用。對(duì)于隔天再檢測(cè)的樣本及時(shí)分裝后凍存在-20℃冷藏箱中備用，有條件的*是在-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。同時(shí)為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制。我們實(shí)驗(yàn)中的常規(guī)標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、組織、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1．血清...
ELISA試劑盒的包被問(wèn)題是什么？
2020-05-20 在使用ELISA試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，需要注意很多問(wèn)題，比如溫育、顯色、包被等問(wèn)題。其中，包被是要特別注意的一個(gè)問(wèn)題，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的效果。今天小編就領(lǐng)著大家一起來(lái)看看這其中的奧妙吧！包被的方式將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸...
人（Human）HA tag標(biāo)簽（HA tag） ELISA檢測(cè)試劑盒
2020-05-19 本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷人（Human）HAtag標(biāo)簽（HAtag）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被HAtag標(biāo)簽（HAtag）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HAtag標(biāo)簽（HAtag）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（...
ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題與解決方法
2020-04-23 ELISA試劑盒以其特重復(fù)性好、異性強(qiáng)、敏感性高等優(yōu)點(diǎn)，在科研中深受各大科研工作者的喜愛(ài)。ELISA方法實(shí)驗(yàn)常會(huì)出現(xiàn)一些結(jié)果不好的現(xiàn)象，小編總結(jié)了常見(jiàn)的幾大類(lèi)問(wèn)題和對(duì)應(yīng)的解決方案，具體如下：ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色淡、靈敏度偏低可能原因與具體解決辦法如下：1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高解決辦法：盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫2、試劑盒未充分平衡解決辦法：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。3、培養(yǎng)箱溫度不...
雪卡毒素檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
2020-04-09 雪卡毒素酶聯(lián)免疫分析（ELISA）本試劑盒僅供研究使用。1使用目的：本試劑盒用于魚(yú)、蝦和肉類(lèi)組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣等樣本中雪卡毒素的定量檢測(cè)。2實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔板包被有雪卡毒素偶聯(lián)抗原，加入雪卡毒素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離雪卡毒素與微孔條上預(yù)包被的雪卡毒素偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗雪卡毒素抗體酶標(biāo)記物，用TMB底物顯色，加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，吸光值與樣品中雪卡毒素含量成反比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)...
ELISA實(shí)驗(yàn)中制備抗體酶結(jié)合物的常用方法
2020-03-29 酶標(biāo)記的抗原或抗體稱(chēng)為結(jié)合物。抗原由于化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，可用不同的方法與酶結(jié)合。如蛋白質(zhì)抗原，基本上可參考抗體酶標(biāo)記的方法。ELISA制備抗體酶結(jié)合物的方法通常有以下幾種。1.戊二醛交聯(lián)法戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，可以使酶與蛋白質(zhì)或者其他抗原的氨基通過(guò)它而偶聯(lián)。戊二醛交聯(lián)可用一步法（如連接AP），也可用二步法（如連接HRP）。舉例如下：2mg~5mg純抗體與5mgAP混合與0.1mol/LpH6.8的磷酸緩沖液1mL中，4℃下對(duì)相同緩沖液透析平衡。磁力攪拌下，緩慢加入1%戊二醛0...
小鼠免疫球蛋白M試劑盒有效期是多久？
2020-03-16 小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：0.1ng/ml-4ng/ml使用目的：本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白M(IgM)，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色...

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