小鼠ELisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法

    小鼠ELisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　小鼠ELisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法

　　1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

　　3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　小鼠ELisa試劑盒操作注意事項

　　1.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶溶解后再使用。

　　2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3.標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白；預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

　　4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

　　5.所有液體組分使用前充分搖勻。